小新和風間一行人正常來到幼稚園上課，大家發現突然今天比往常多出來了一間神秘教室。不僅如此，整個幼稚園都空無一人，連老師和園長都沒在，他們以為大家在躲貓貓，于是開始一間一間的找同學們和老師們。
當他們找到那間多出來的教室時，恐怖的事情發生了：最先是那間房間門自動關上，隨后出現了鬼火，妮妮，阿呆他們也一個接一個地不見了....
除了這集是發生在幼稚園的恐怖事件，還有一集，是在第809集，幼兒園有個傳言，廁所旁邊的樓梯，上去和下去的臺階數不一樣。這天半夜，五個小伙伴一起去上廁所，路過廁所時，看見了傳聞中的樓梯！第二天白天，大家想要再次去爬那個樓梯，克服心里的恐懼，可是到廁所門口時，他們發現樓梯居然不見了！
最可怕的是第二天吉永老師告訴他們：“你們在胡說什么啊，幼兒園哪有樓梯，我們幼兒園根本就沒有二樓啊！”